| dc.contributor.advisor |
Víchová, Zdenka
|
|
| dc.contributor.author |
Valášková, Kristýna
|
|
| dc.date.accessioned |
2025-10-31T08:50:53Z |
|
| dc.date.available |
2025-10-31T08:50:53Z |
|
| dc.date.issued |
2020-08-02 |
|
| dc.identifier |
Elektronický archiv Knihovny UTB |
|
| dc.identifier.isbn |
978-80-7678-363-8 |
cs |
| dc.identifier.uri |
http://hdl.handle.net/10563/56902
|
|
| dc.description.abstract |
Živé tkáně jsou vysoce dynamické systémy, v nichž neustále probíhá a mění se řada strukturálních, mechanických, biochemických a biologických podnětů v rámci trojrozměrné struktury. Buňky a tkáňové scaffoldy (extracelulární matrix) hrají rozhodující a synergickou roli nejen při tvorbě architektury tkáně, ale také při udržování její fyziologické funkce. Proto musí být při přípravě rekonstituovaných tkání splněna úloha jak buněk, tak i scaffoldů. Jedná se o dynamickou, multidisciplinární oblast výzkumu, kde jsou modely v závěru použitelné pro tkáňové inženýrství a regenerativní medicínu, modelování nemocí a případné experimenty in vitro. V rámci práce je hlavní pozornost věnována rekonstituovaným trojrozměrným (3D) modelům kůže. Modely by tedy měly umožnit rekonctituci architektury kožní tkáně a jejího mikroprostředí, umožnit zkoumání interakce buňka-matrix a mezi různými typy kožních buněk, a koneckonců i funkci a fyziologii kožní tkáně in vivo. Cílem práce je objasnit přípravu kolagenové vrstvy a následné zajištění správné ko-kultivace fibroblasty-keratinocyty s výsledkem vytvořeného plně funkčního kožního ekvivalentu in vitro. Bez ohledu na to mohou být buňky kožní tkáně, respektive dermální fibroblasty, použity jako scaffoldy extracelulární matrix samosestavené z fibroblastových buněk (CAM). Tato metodika využívá vlastní schopnost buněk produkovat vlastní extracelulární matrix (ECM), místo použití syntetických nebo přírodních materiálů jako scaffold. CAM scaffold může být vytvořen a řízen i vnějšími faktory, jako je mechanická stimulace. V této práci byly kultivovány lidské kožní fibroblasty za podmínek in vitro s kyselinou askorbovou, podporující tvorbu ECM. Výsledkem je neporušená ECM, která zachovává složení a strukturu původní tkáně a zároveň vykazuje vylepšené vlastnosti pro řízení buněčného chování, například anizotropii. Přestože CAM dokáže věrně napodobit biochemické a základní strukturu ECM, postrádá plnou hierarchickou složitost a mechanické vlastnosti přirozené tkáně. Tyto instruktivní vlastnosti buněk poté ovlivňují kvalitu a funkčnost CAM scaffoldů a jsou utvářeny interakcemi mezi buňkami a ECM, které lze modulovat pomocí biochemických/biofyzikálních signálů pro aplikace tkáňového inženýrství. Pro studium těchto interakcí jsme vytvořili ko-kultivační platformu lidských dermálních fibroblastů a H9c2 kardiomyoblastů v různých poměrech. Tento přístup je v souladu s výsledky studií na decelularizovaných CAM, které zachovávají klíčové složky extracelulární matrix zásadní pro buněčnou adhezi a růst. CAM scaffoldy obdobně podporují proliferaci buněčné linie H9c2, poskytují plně buněčný, imunologicky bezpečný a biologicky přirozený substrát, který zlepšuje buněčné signály a umožňuje tvorbu fyziologicky relevantních tkáňových modelů. |
|
| dc.format |
94 |
cs |
| dc.language.iso |
en |
|
| dc.publisher |
Univerzita Tomáše Bati ve Zlíně |
|
| dc.rights |
Bez omezení |
|
| dc.subject |
tkáňové inženýrství
|
cs |
| dc.subject |
trojrozměrný model kůže
|
cs |
| dc.subject |
organotypická kultura
|
cs |
| dc.subject |
biomateriály
|
cs |
| dc.subject |
extracelulární matrix sestavená z buněk
|
cs |
| dc.subject |
kokultivace
|
cs |
| dc.subject |
tissue engineering
|
en |
| dc.subject |
three-dimensional skin model
|
en |
| dc.subject |
organotypic culture
|
en |
| dc.subject |
biomaterials
|
en |
| dc.subject |
cell-assembled extracellular matrix
|
en |
| dc.subject |
co-culture
|
en |
| dc.title |
Příprava rekonstituovaných tkání |
|
| dc.title.alternative |
Preparation of reconstituted tissues |
|
| dc.type |
disertační práce |
cs |
| dc.contributor.referee |
Pacherník, Jiří |
|
| dc.contributor.referee |
Vostálová, Jitka |
|
| dc.date.accepted |
2025-09-04 |
|
| dc.description.abstract-translated |
Living tissues are highly dynamic systems in which continuously changing structural, mechanical, biochemical, and biological cues are intrinsically combined within three-dimensional structures. Cells and tissue scaffolds (extracellular matrix) play a critical and synergistic role, not only in the formation of tissue architecture but also in the maintenance of its physiological function. Therefore, both the role of cells and scaffolds are required to play integral roles in the construction of reconstituted tissues. This is a dynamic and multidisciplinary area of research. Models are finally applicable to tissue engineering and regenerative medicine, disease modeling, and in vitro experiments. Within the thesis, the main attention is paid to in vitro reconstituted three-dimensional (3D) models of skin. Models should allow the reconstitution of a skin architecture, and micro-environment, to enable the investigation of cell-matrix and cell-cell interactions between different cell types, and finally even mimic the function and physiology of their in vivo tissue counterparts. The work aims to clarify the preparation of the collagen layer and the subsequent provision of an appropriate fibroblast-keratinocyte co-culture resulting in the functional skin equivalent in vitro. Regardless of this, the skin tissue cells, respectively, dermal fibroblasts, can be used as cell-assembled extracellular matrix (CAM) bio-scaffolds. Instead of using synthetic or natural materials as scaffolds, this approach harnesses the inherent ability of cells to produce their own ECM. The 3D architecture of CAM sheet can be formed and controlled by external factors such as mechanical stimulation. In our research, human dermal fibroblasts were cultured in vitro with ascorbic acid to promote cell-made scaffold assembly and deposition, resulting in intact ECM that preserves tissue composition and architecture, with enhanced cell-instructive properties like anisotropy. While CAM replicates biochemical and some structural ECM features, it lacks full hierarchical complexity and mechanical properties of native tissue. These cell-instructive properties influence CAM quality and functionality, shaped by cell-ECM interactions and modifiable through bio- physical/chemical cues for tissue engineering applications. To study this, a co-culture platform of human dermal fibroblasts and H9c2 cardiomyoblasts was established at varying ratios. This approach aligns with findings from decellularised CAM scaffolds, which preserve key ECM components critical for cell adhesion and growth. CAM scaffolds similarly support H9c2 proliferation, providing a fully cellular, immunogenically safe, biologically native substrate that enhances cell signalling and enables physiologically relevant tissue models. |
|
| dc.description.department |
Univerzita Tomáše Bati ve Zlíně |
|
| dc.thesis.degree-discipline |
- |
cs |
| dc.thesis.degree-grantor |
Univerzita Tomáše Bati ve Zlíně. Univerzita Tomáše Bati ve Zlíně |
cs |
| dc.thesis.degree-grantor |
Tomas Bata University in Zlín. Tomas Bata University in Zlín |
en |
| dc.thesis.degree-name |
Ph.D. |
|
| dc.thesis.degree-program |
Biomateriály a biokompozity |
cs |
| dc.thesis.degree-program |
Biomaterials and Biocomposites |
en |
| dc.identifier.stag |
72058
|
|
| dc.date.submitted |
2025-07-09 |
|
